期刊简介
综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊)， 旨在传播医学新理论，交流医学新技术，面向临床，重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。
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- 杂志名称：实用医学杂志
- 主管单位：广东省卫生厅
- 主办单位：广东省医学情报研究所
- 国际刊号：1006-5725
- 国内刊号：44-1193/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
可诱导表达mIL-12单链融合蛋白的腺病毒载体的构建
陈坚；XUE Xu-chao；方国恩；SU Chang-qing；钱其军
关键词：白细胞介素12, 腺病毒科, 遗传载体, 基因调控, RU486
摘要：目的:构建带mIL-12单链融合蛋白基因并可经RU486诱导表达的重组腺病毒载体,以期用于体内的基因治疗研究.方法:构建穿梭质粒pDC-RUmIL-12,使mIL-12单链融合蛋白基因和启动子在RU486诱导表达系统调控之下,酶切、测序鉴定正确后,将其与Admax腺病毒包装系统的辅助质粒共转染HEK293细胞后,构建出可调控的重组腺病毒载体,用mIL-12引物对病毒进行鉴定,氯化铯密度梯度离心纯化病毒,终稀释法测定其滴度,并在结肠癌SW620细胞中Western Blot和ELISA法检测其基因调控效果.结果:经PCR鉴定证实可调控腺病毒载体Ad-RUmlL-12构建正确,病毒滴度达到4.62×1010pfu/mL.当给予诱导剂RU486后,腺病毒载体可以诱导表达mIL-12单链融合蛋白,表达量随着诱导剂浓度而增加,而没有RU486时,几乎没有mIL-12蛋白的表达,结论:成功构建了重组腺病毒 Ad-RUmIL-12,可以通过RU486诱导mIL-12单链融合蛋白的表达,为下一步体内基因治疗奠定了良好的基础.
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