期刊简介

               综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊), 旨在传播医学新理论,交流医学新技术,面向临床,重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。                

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  • 杂志名称:实用医学杂志
  • 主管单位:广东省卫生厅
  • 主办单位:广东省医学情报研究所
  • 国际刊号:1006-5725
  • 国内刊号:44-1193/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
实用医学杂志2008年第05期

pIRES2-EGFP/Cbfal真核双表达载体的构建及鉴定

陈雄;尚永军;李东

关键词:成骨细胞, 核心结合因子, pIRES2-EGFP, 基因治疗
摘要:目的:构建成骨细胞特异性转录因子Cbfal双表达载体,以期用于成骨的体内、外研究.方法:以含有全长cDNA的pCMV/Cbfal为模板,PCR扩增Cbfal,T-A克隆,酶切亚克隆到pIRES2-EGFP载体上,酶切、PCR及测序鉴定正确后命名为pIRES2-EGFP,脂质体转染NIH3T3细胞,G418筛选稳定表达后,提取细胞的总蛋白,Western blot检测Cbfal蛋白的表达,以未转染组为对照.结果:酶切、PCR及测序证实pIRES2-EGFP/Cbhl载体序列正确,脂质体法转染NIH3T3细胞后可见绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测到Cbfal在蛋白水平的表达.结论:pIRES2-EGFP/Cbfal栽体构建成功,可为后续研究奠定基础.