期刊简介
综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊), 旨在传播医学新理论,交流医学新技术,面向临床,重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。
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首页>实用医学杂志

- 杂志名称:实用医学杂志
- 主管单位:广东省卫生厅
- 主办单位:广东省医学情报研究所
- 国际刊号:1006-5725
- 国内刊号:44-1193/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
小鼠VEGFR-2胞外片段重组蛋白的制备及其在检测抗VEGFR-2抗体中的初步应用
肖博宇;付晓;李春阳;夏燕;唐淑君;杨文;王艳林
关键词:血管内皮生长因子受体2, 原核表达, 蛋白纯化, 小鼠
摘要:目的:原核表达和纯化小鼠血管内皮生长因子受体2 (VEGFR-2)胞外区功能片段并用于抗VEGFR-2抗体的检测.方法:用PCR技术扩增编码VEGFR-2胞外区的DNA片段,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)并转化大肠杆菌Rossetta(DE3).在尿素变性条件下用Ni-NTA树脂亲和层析纯化IPTG诱导表达的基因融合蛋白,并用抗His抗体和抗VEGFR-2抗体分别对融合蛋白进行Western blotting鉴定.ELISA法用于分析VEGFR-2胞外区功能片段在检测抗VEGFR-2抗体中的应用价值.结果:克隆获得为小鼠VEGFR-2胞外功能区(Aa 134-Aa417)编码的DNA片段并构建原核表达质粒.将上述质粒转化大肠杆菌后,高效诱导表达出VEGFR-2胞外区功能片段的融合蛋白.尿素变性条件下纯化的融合蛋白能特异性被抗His标签抗体和抗VEGFR-2抗体识别和结合.用上述原核表达的VEGFR融合蛋白建立的ELISA方法可检测样品中抗VEGFR-2抗体的含量.结论:本实验成功建立了VEGFR-2胞外区功能片段原核表达和纯化的方法,获得的VEGFR-2胞外区功能片段可用于抗VEGFR-2抗体效价的检测.
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