期刊简介
综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊)， 旨在传播医学新理论，交流医学新技术，面向临床，重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。
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首页>实用医学杂志
- 杂志名称：实用医学杂志
- 主管单位：广东省卫生厅
- 主办单位：广东省医学情报研究所
- 国际刊号：1006-5725
- 国内刊号：44-1193/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
单纯疱疹Ⅱ型病毒UL29基因shRNA表达载体的干扰效应
黄畅；潘晓瑜；袁俊杰；吕延成
关键词：疱疹病毒2型, 人, RNA干扰, shRNA, UL29基因
摘要：目的：应用RNA干扰技术，针对单纯疱疹Ⅱ型病毒（HSV-2）UL29基因构建短发夹RNA重组表达载体，观察其对HSV-2的干扰效应。方法：针对HSV-2 UL29基因筛选出4条拟干扰靶位点序列，分别设计、合成4组靶向UL29基因shRNA的基因真核表达载体。通过脂质体转染到HEK293细胞。再将HSV-2接种到HEK293细胞中。采用终点滴定法检测病毒滴度，RT-PCR检测shRNA对转录水平的影响，Western-blot检测shRNA对蛋白质表达水平的影响。结果：终点滴定法结果显示UL29shRNA各组均可不同程度降低病毒感染滴度，与空白组（未转染重组表达载体）比较差异显著（P＜0．01）。RT-PCR结果显示，与空白组比较，4组抑制率分别为28．80％、59．95％、66．08％、36．27％，差异均具有显著性（P＜0．05），shRNANC（不针对任何基因的序列）与空白组相比差异无显著性，其中以UL29shRNA1461组效果为佳。 Western-blot检测表明UL29shRNA各组ICP8蛋白表达水平比阴性对照组明显降低。结论：UL29shRNA能有效干扰HSV-2UL29基因的表达，抑制HSV-2在HEK293细胞中的复制。
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