期刊简介
综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊)， 旨在传播医学新理论，交流医学新技术，面向临床，重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。
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首页>实用医学杂志
- 杂志名称：实用医学杂志
- 主管单位：广东省卫生厅
- 主办单位：广东省医学情报研究所
- 国际刊号：1006-5725
- 国内刊号：44-1193/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
CXCR4慢病毒表达载体的构建及细胞转染
段司沁；范遥；赵雪；曹园芝；谭毅；龙北国；马伟峰
关键词：CXCR4, 慢病毒, 乳腺癌细胞
摘要：目的：构建高表达CXCR4慢病毒并转染MCF-7细胞，获得高表达CXCR4的MCF-7细胞。方法：RT-PCR法扩增CXCR4基因，构建重组质粒CXCR4／pSin-EF2，与psPAX2、pMD2G质粒共转染HEK293T细胞包装慢病毒，以空载体包装的病毒为对照，将包装慢病毒感染人乳腺癌细胞MCF-7。 RT-PCR和Western blot检测转染前后CXCR4基因和蛋白的表达，流式细胞术检测细胞表面CXCR4受体表达。结果：双酶切和测序结果证实重组质粒CXCR4／pSin-EF2构建成功，转染HEK293T细胞获得高滴度慢病毒，RT-qPCR和Western blot证实病毒转染MCF-7细胞中CXCR4表达量显著增高（P ＜0．05），流式测得CXCR4阳性细胞由26．78％升到99．29％，而MCF-7Vector细胞膜表面CXCR4表达量与未转染病毒MCF-7细胞无明显差异。结论：成功构建CXCR4慢病毒表达载体，获得CXCR4受体稳定高表达的乳腺癌细胞。
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