期刊简介

               综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊), 旨在传播医学新理论,交流医学新技术,面向临床,重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。                

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  • 杂志名称:实用医学杂志
  • 主管单位:广东省卫生厅
  • 主办单位:广东省医学情报研究所
  • 国际刊号:1006-5725
  • 国内刊号:44-1193/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
实用医学杂志2015年第09期

Ficoll 和Percoll法分离结直肠癌相关巨噬细胞的比较

杨芳;伍菲凡;王晓燕;胡志燕;李祖国

关键词:结直肠肿瘤, 肿瘤相关巨噬细胞, Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法, Percoll 非连续密度梯度离心法, 贴壁分离
摘要:目的:比较Percoll非连续密度梯度离心法、Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法分离结直肠癌中的巨噬细胞的效果,并进一步探讨贴壁分离巨噬细胞的适宜贴壁时间。方法:取结直肠癌患者的肿瘤组织,制成单个细胞的悬液,分别使用100% Ficoll、35% Percoll 以及25%与65%双梯度 Percoll 进行巨噬细胞分离,37℃培养2 h后,去除未贴壁的细胞,使用免疫荧光实验来检测巨噬细胞的纯度。之后,将Ficoll分离得到的单个核细胞,分别培养1、2、4和9 h后比较巨噬细胞的纯度。结果:Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法分离的巨噬细胞的纯度为60.18%,Percoll 非连续密度梯度离心法分离的巨噬细胞的纯度分别为54.33%和10.93%,均低于Ficoll法分离所得到的巨噬细胞的纯度(P <0.05)。 Ficoll分离后贴壁1、2、4 h 分离得到的巨噬细胞纯度均达到60%以上,高于贴壁培养9 h得到的巨噬细胞的纯度(34.67%)。结论: Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离巨噬细胞,纯化程度好,是一种简单、高效的巨噬细胞分离方法,适于临床和科研中广泛应用。贴壁培养2~4h是贴壁分离巨噬细胞适宜的时间。