期刊简介
综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊)， 旨在传播医学新理论，交流医学新技术，面向临床，重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。
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首页>实用医学杂志
- 杂志名称：实用医学杂志
- 主管单位：广东省卫生厅
- 主办单位：广东省医学情报研究所
- 国际刊号：1006-5725
- 国内刊号：44-1193/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
人博卡病毒重组蛋白表达及间接酶联免疫法检测的建立
张允奇；何涛君；陆学东；张银辉
关键词：人博卡病毒, 原核表达, 间接酶联免疫法
摘要：目的：原核表达并纯化人博卡病毒结构蛋白 VP2，并建立间接酶联免疫法，用于病毒感染的检测。方法：本研究采用PCR法从菌种模板WHL-1扩增出人博卡病毒结构蛋白VP2基因片段，克隆至表达载体pET28a中，转化到菌BL21（DE3），经过诱导产生融合蛋白，使用Western blot 检测，并以该蛋白为包被抗原建立检测血清人博卡病毒的间接酶联免疫法。结果：重组原核表达质粒经双酶切鉴定构建正确，并可与人博卡病毒 IgG阳性血清发生特异性反应，建立的间接酶联免疫法佳抗原包被浓度为2 mg／mL ，血清的佳稀释倍数为1∶200，封闭以1％BSA封闭效果佳，酶标二抗的佳工作稀释度为1∶4000，工作时间佳为1 h，该检测方法有较好的特异性和重复性。建立的间接 ELISA 方法 Cut-off 值为0．1，灵敏度为92％，特异性为98％，与对照试剂检测结果的符合率为97％。结论：原核表达并纯化了人博卡病毒结构蛋白VP2蛋白建立的间接酶联免疫法，为人博卡病毒的血清抗体检测方法提供了依据。
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