期刊简介
综合性医学学术性期刊(国家科技部统计源期刊、中国科技核心期刊)， 旨在传播医学新理论，交流医学新技术，面向临床，重点在实用。本刊读者对象为各级临床医护人员。报道的内容为全国各地医学科研成果、临床实践和实用性较强的新技术、新方法。
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首页>实用医学杂志
- 杂志名称：实用医学杂志
- 主管单位：广东省卫生厅
- 主办单位：广东省医学情报研究所
- 国际刊号：1006-5725
- 国内刊号：44-1193/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
霍乱疫苗株溶血素hlyA基因敲除及绿色荧光蛋白构建
杨秋；周妍妍；阚飙；芮勇宇
关键词：霍乱弧菌, 减毒活疫苗, 基因重组, 绿色荧光蛋白
摘要：目的：探讨霍乱疫苗株 NFYY101溶血素 hlyA 基因敲除及绿色荧光蛋白的构建。方法：将 hlyA基因上游片段（hlyAup）、hlyA 下游片段（hlyAdown），克隆入 pUC18中，再在两者间插入绿色荧光蛋白（lacz-GFPuv ）基因，获得重组质粒 pUC18-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown ，再构建重组自杀质粒 pCVD442-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown ，接合入霍乱疫苗株 NFYY101中，进行同源重组。结果：正确构建重组自杀质粒pCVD442-hlyAup-laczGFPuv-hlyAdown 表达绿色荧光蛋白，成功缺失了疫苗株候选株 NFYY101的 hlyA 基因，在敲除位置同源重组入绿色荧光蛋白基因并表达。结论：成功构建表达绿色荧光蛋白的重组自杀质粒，可用于O1群及O139群霍乱疫苗株hlyA基因敲除及绿色荧光蛋白构建。
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